人ELISA試劑盒中zui為常用的標(biāo)本是血漿或血清,有時由于特定的檢測項目,也常用到尿液、唾液、糞便等標(biāo)本。目前血漿血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。在收集處理和保存上要注意下面幾點:
1.要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
2.要注意樣本的采集及血清分離中要盡量避免細(xì)菌污染,這是因為細(xì)菌的生長,所分泌的一些酶可能會對抗體抗原蛋白產(chǎn)生分解作用;有些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身就會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的方法測定產(chǎn)生非特異性干擾。
3.血清標(biāo)本應(yīng)該以無菌操作分離,可以在2~8℃下保存一周,樣本的長時間保存,要在-70℃保存。如為有菌操作,則建議冰凍保存